什么是文庫構(gòu)建？

基于NGS測序的諸多優(yōu)點，故此技術(shù)在全球測序市場上占有著絕對的優(yōu)勢位置，而新一代測序（NGS）文庫制備是一體化測序流程中的一個關鍵因素，那么什么是文庫構(gòu)建呢？讓我們一起來看看吧！

基因文庫是儲存了某種生物的DNA片段的受體菌的集合體。文庫分為儲存全部DNA片段和部分DNA片段，前者叫基因組文庫，后者包括cDNA文庫。

文庫構(gòu)建的基礎是將目標RNA或DNA制備成可以和測序儀器兼容的形式。從組織或者細胞中將DNA或RNA提取出來，并通過機械破碎或者是酶切法對其進行片段化。如果前面提取的是RNA樣本，則需要將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。對DNA進行接頭的連接后，一般還會有一個文庫的擴增，即通過PCR來對所需的目的片段進行擴增，然后進行上機測序。

傳統(tǒng)的DNA文庫構(gòu)建包括：DNA片段化（超聲法）、末端修復、加A、接頭連接和PCR文庫擴增等過程（Figure 1）。整個實驗對DNA起始量、儀器有一定的要求。

新型的文庫構(gòu)建方法利用轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)座原理，對DNA進行片段化并同時加上部分接頭序列，是建庫過程中是一個重大的進步。

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