Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項

Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒是一款靈敏度高且能快速簡便地檢測細胞凋亡的產(chǎn)品。本試劑盒可通過流式細胞儀來進行懸浮細胞、貼壁細胞的流式凋亡檢測。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項是什么嗎？讓我們一起來看看吧！

一、檢測原理

細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些特異性的DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。使得凋亡細胞的DNA被切割成180~200bp片段，在瓊脂糖凝膠上通常以180~200bp 的階梯狀遷移。細胞經(jīng)過固定破膜后，TdT酶（脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶）將熒光標記的dUTP 連接到細胞斷裂DNA 暴露的 3'-OH 末端，通過流式細胞儀檢測 dUTP偶聯(lián)物發(fā)出的熒光信號，從而來檢測晚期凋亡。

二、保存條件

-20°C 保存，保質(zhì)期一年。Labeling Solution 需避光保存，Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反復(fù)多次凍融，建議分裝保存。

三、注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究使用。

2. 請注意安全事項，遵守實驗室試劑操作規(guī)范操作。

3. 用于該試劑盒的檢測樣本zui低細胞數(shù)目不低于 5×105個。

4. 實驗中需要重懸細胞的步驟，用移液器輕輕吹打細胞 10~20次，吹打時請勿將槍頭中的液體wan全吹出，避免造成細胞損傷和產(chǎn)生過多的氣泡。

5. 離心去上清的操作要小心謹慎，避免造成細胞損失。

6. Labeling Solution和TdT Enzyme 應(yīng)避免反復(fù)凍融和渦旋操作。

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